Registrazione delle risposte uditive del tronco encefalico in un cucciolo di ratto

Immobilizzare un cucciolo di ratto anestetizzato in uno stampo di schiuma.

Posizionare il cucciolo su un tavolo antivibrante all'interno di una stanza insonorizzata per ridurre al minimo le vibrazioni e gli artefatti legati al rumore. Posizionare un termoforo sotto per mantenere la temperatura corporea.

Sterilizzare la testa.

Praticare delle incisioni vicino alle orecchie esterne per posizionare gli elettrodi di riferimento e di messa a terra.

Quindi, inserire l'elettrodo di registrazione sotto la pelle in corrispondenza del vertice del cranio.

Utilizzando un altoparlante collegato a un generatore di suoni, è possibile emettere impulsi sonori di frequenze e intensità variabili.

Le vibrazioni meccaniche degli impulsi sonori deviano le proiezioni delle cellule ciliate nell'orecchio interno del ratto.

Questa deflessione apre canali ionici meccanicamente dipendenti, inducendo un afflusso di ioni positivi e la depolarizzazione delle cellule ciliate.

Le cellule ciliate depolarizzate rilasciano neurotrasmettitori, che si legano ai recettori neuronali dell'orecchio interno, generando potenziali d'azione.

I potenziali d'azione si propagano attraverso il nervo uditivo fino al tronco encefalico.

L'elettrodo di registrazione rileva il segnale, che un processore converte nella risposta uditiva del tronco encefalico.

Per iniziare questa procedura, posizionare l'animale anestetizzato in uno stampo in schiuma di polietilene per immobilizzare il corpo dell'animale. Quindi, posizionare l'animale su un tavolo antivibrante in una stanza fonoassorbente. Mantieni la temperatura corporea dell'animale a 37,5 gradi Celsius con un termoforo.

Quindi, pulire la zona della testa con etanolo al 70%. Praticare un'incisione da 1 a 2 millimetri ventrolateralmente al padiglione auricolare esterno, per posizionare l'elettrodo di riferimento o l'elettrodo di terra. Quindi, posizionare un elettrodo di registrazione sottocutaneo sul vertice del cranio.

Utilizzando il generatore di funzioni, genera esplosioni di tono calibrate di varie frequenze e intensità. Eroga gli stimoli sonori attraverso un altoparlante elettrostatico situato a 10 centimetri di distanza dalla testa dell'animale.

Per ottenere le risposte uditive del tronco encefalico, i potenziali suscitati dal suono vengono filtrati, amplificati e mediati utilizzando un processore multifunzione. La registrazione ABR di 40 minuti viene monitorata online e archiviata per l'analisi offline.