Registrazioni elettroencefalografiche concomitanti e di potenziale di campo locale in un ratto anestetizzato

Fissare un ratto anestetizzato a un telaio stereotassico con il cranio esposto.

Il ratto ha un foro nel cranio con la dura madre forata, un'incisione sul collo ed elettrodi stimolanti attaccati ai suoi cuscinetti dei baffi.

Fissare un elettroencefalogramma, o EEG, un elettrodo di ragno spalmato di pasta conduttiva sul cranio, mantenendo libero il foro della bava.

L'elettrodo a ragno misura l'EEG superficiale, riflettendo l'attività neuronale complessiva dall'area corticale sottostante.

Montare un microelettrodo lineare multicanale su un micromanipolatore.

Inserire il microelettrodo nella corteccia cerebrale attraverso il foro della fresa fino a una profondità di 1500 micrometri.

Il microelettrodo misura il potenziale di campo locale, o LFP, che riflette l'attività neuronale corticale.

Posizionare gli elettrodi di riferimento EEG e LFP all'interno dell'incisione del collo.

Collegare gli elettrodi di registrazione e di riferimento a un preamplificatore collegato a un'unità di acquisizione dati.

Applicare stimoli elettrici ai cuscinetti dei baffi e regolare la profondità del microelettrodo per massimizzare l'ampiezza LFP evocata. Registra i segnali EEG e LFP co-localizzati.

In questa procedura, pulire e asciugare il cranio che circonda il foro della bava utilizzando un batuffolo di cotone. Applicare con cautela la pasta EEG conduttiva su un lato piatto di un elettrodo a ragno EEG. Lasciare un piccolo foro libero dalla pasta EEG sull'elettrodo a ragno per consentire a un microelettrodo multilaminare di passare attraverso il foro senza entrare in contatto con la pasta e l'elettrodo a ragno.

Allineare l'elettrodo a ragno con il foro della bava nel cranio con la pasta EEG rivolta verso il cranio. Premere con cautela l'elettrodo del ragno sul cranio, stabilendo un contatto saldo con il cranio tramite la pasta EEG.

Rimuovere la pasta che oscura il foro della bava usando un ago su una siringa e rimuovere la pasta EEG in eccesso oltre la periferia dell'elettrodo a ragno, in modo che il contatto tra l'elettrodo a ragno e il cranio sia spazialmente limitato alle dimensioni dell'elettrodo. Quindi, spalmare la pasta EEG sull'elettrodo di riferimento per l'EEG e posizionarla saldamente all'interno dell'incisione nella parte posteriore del collo del ratto.

Quindi, collegare gli elettrodi EEG al preamplificatore tramite uno splitter di segnale passivo per segnali a bassa impedenza. A questo punto, testare la resistenza della sonda EEG per assicurarsi che sia inferiore a cinque kiloohm. In caso contrario, aggiungi altra pasta EEG e assicurati che l'elettrodo del ragno abbia un buon contatto con il cranio.

Successivamente, montare un braccio micromanipolatore sul telaio stereotassico. Collegare un microelettrodo lineare a 16 canali a un stadio di testa acuto a 16 canali agganciato saldamente al braccio del micromanipolatore. Quindi, spalmare la pasta EEG sull'elettrodo di riferimento per il microelettrodo, quindi posizionarla saldamente all'interno dell'incisione accanto all'elettrodo di riferimento per l'EEG. Regolare l'angolo del braccio del micromanipolatore in modo che il microelettrodo sia perpendicolare alla superficie corticale.

Ora, abbassare il microelettrodo al microscopio in modo che la punta del microelettrodo sia puntata verso la minuscola apertura nella parte inferiore del foro della bava, fino a quando l'elettrodo più in alto non penetra appena la superficie corticale. Prestare attenzione per evitare di forzare il microelettrodo sulla superficie della dura, poiché ciò romperebbe l'elettrodo.

Inserire il microelettrodo sulla superficie corticale a una profondità di 1500 micrometri. Regola la profondità applicando un treno di stimoli al pad dei baffi e osservando l'LFP evocato a 16 canali sul monitor di un PC. Ruotare con cautela la manopola dell'asse z sul micromanipolatore fino a quando non si verifica l'ampiezza massima dell'LFP evocato, poiché questo coincide con lo strato 4 nella corteccia.