JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:58 min. • July 8th, 2025
Fissa un topo sveglio in una cornice stereotassica, con un filo d'argento inserito nella sua dura madre e un'apertura che espone una regione del cervello che elabora gli stimoli uditivi.
Inserire una soluzione farmacologica in una pipetta di vetro multibarrel dotata di un elettrodo di tungsteno e fissarla al supporto del telaio stereotassico.
Inserire fili d'argento non rivestiti nei fusti, assicurandosi che un'estremità entri in contatto con la soluzione mentre l'altra si colleghi a un dispositivo che controlla il rilascio del farmaco.
Collegare i terminali positivo e di terra dei fili di registrazione rispettivamente all'elettrodo di tungsteno e al filo d'argento a contatto con la dura.
Posizionare l'elettrodo multibarile sulla superficie del cervello e applicare gli stimoli uditivi.
Registra l'attività neuronale.
Quindi, applicare una corrente positiva per rilasciare il farmaco.
Il farmaco entra nel cervello e blocca specifici recettori, impedendo il legame con i neurotrasmettitori inibitori e aumentando l'eccitabilità neuronale.
Infine, applicare nuovamente gli stimoli uditivi e identificare l'aumento della risposta neuronale dopo il trattamento farmacologico.
In questa procedura, posizionare il corpo dell'animale in un sistema di ritenuta imbottito in schiuma su misura. Fissare il palo della testa a un supporto fissato al telaio stereotassico. Questo è un buon momento per dare all'animale una ricompensa liquida. Quindi, copri il corpo dell'animale con una coperta di cotone e fissalo senza stringere usando un emicilindro di plastica e del nastro adesivo.
Utilizzare una siringa con punta flessibile per riempire i fusti con i farmaci scelti. Utilizzando il micromanipolatore, posizionare l'elettrodo multi-barilotto sul suo supporto. Quindi, posiziona un filo d'argento non rivestito all'interno di ciascun barilotto in modo che un'estremità entri in contatto con la soluzione e l'altra estremità sia accessibile. Quindi collegare quelle estremità al dispositivo di microionoforesi.
Successivamente, collegare il terminale positivo all'estremità dell'elettrodo di tungsteno e il terminale di terra al filo d'argento che entra in contatto con la dura. Successivamente, spostare l'elettrodo multi-barilotto fino a quando la punta non tocca la superficie del cervello. Applicare soluzione fisiologica sterile calda per prevenire l'essiccazione del tessuto cerebrale. A quel punto, applicare la corrente di ritenzione per evitare perdite di farmaco dalla punta del cilindro durante la ricerca dell'attività di una singola unità. Registrare l'attività neurale e l'applicazione ionoforetica della gabazina.