Imaging della segnalazione del calcio indotta dalla nicotina lungo gli assoni dell'ippocampo ventrale in co-colture sinaptiche

Prendete le co-colture geneticamente modificate di fette di ippocampo ventrale di topo e neuroni del nucleo accumbens su un vetrino coprioggetti.

I neuroni dell'ippocampo proiettano i terminali degli assoni pre-sinaptici sovraesprimendo i recettori nicotinici dell'acetilcolina, formando sinapsi con i neuroni del nucleo accumbens post-sinaptico.

I neuroni sono caricati con un colorante indicatore di calcio per le misurazioni intracellulari del calcio.

Trasferire il vetrino coprioggetti in una camera per microscopio confocale perfusa con tampone contenente ioni calcio.

Cattura immagini fluorescenti delle proiezioni assonali dell'ippocampo come controllo.

Perfuse la nicotina, che si lega ai recettori nicotinici dell'acetilcolina sui neuroni dell'ippocampo, innescando l'afflusso di calcio.

Gli ioni calcio si legano al colorante intracellulare, aumentando la fluorescenza.

Gli assoni dell'ippocampo rilasciano neurotrasmettitori eccitatori, avviando la trasmissione sinaptica nei neuroni del nucleo accumbens.

Lavare con tampone per rimuovere la nicotina.

Nel tempo, l'attivazione del recettore nicotinico dell'acetilcolina provoca il rilascio di calcio dalle riserve intracellulari, portando