Stimolazione optogenetica e registrazione elettrofisiologica di eventi sinaptici in fette di cervello di ratto

0 visualizzazioni • 3:18 min. • July 8th, 2025

Inizia con una fetta di cervello di ratto contenente la regione del neurone bersaglio collegata a un assone sensibile alla luce di una diversa regione del cervello.

Posizionare la fetta nella camera di registrazione sommersa e fissarla con un'ancora.

Al microscopio, individuare lo strato desiderato e identificare il neurone piramidale bersaglio.

Sollevare l'obiettivo del microscopio per creare un menisco con la superficie della fetta.

Immergere una micropipetta di vetro riempita con soluzione di registrazione intracellulare in questo menisco.

Toccare la cellula piramidale identificata con la punta della pipetta per creare una rientranza nella membrana.

Applicare l'aspirazione per formare un sigillo.

Aumentare l'aspirazione fino a quando la membrana non si rompe, stabilendo una configurazione a cella intera.

Utilizzando una sorgente luminosa montata, applicare impulsi luminosi alla fetta.

Questi impulsi luminosi innescano un potenziale d'azione nell'assone sensibile alla luce, rilasciando neurotrasmettitori nella fessura sinaptica.

Registra le risposte del neurone piramidale a questi rilasci per analizzare l'efficienza sinaptica.

Per l'identificazione della cellula bersaglio, posizi

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