JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:59 min. • July 8th, 2025
Prendete un ratto anestetizzato impiantato con elettrodi stimolanti alla base del collo, vicino al percorso discendente del nervo frenico verso il diaframma.
Gli elettrodi vengono utilizzati per stimolare il nervo frenico, che innerva il diaframma, e ne innesca la contrazione durante l'inalazione.
Un elettrodo di registrazione monitora l'attività elettrica dei muscoli del diaframma, mentre un elettrodo di riferimento stabilisce i segnali di base e un elettrodo di terra riduce il rumore del segnale.
Applicare un impulso elettrico ad alta intensità che genera potenziali d'azione in tutti i motoneuroni all'interno del nervo frenico.
I potenziali d'azione si propagano alla giunzione neuromuscolare e inducono il rilascio di neurotrasmettitori.
I neurotrasmettitori si legano ai recettori sulle fibre muscolari, innescando potenziali d'azione che causano la contrazione muscolare.
Registrare l'attività elettrica aggregata da più fibre muscolari, denominate potenziali d'azione muscolari composti o CMAP, per ottenere la curva di risposta, preceduta da un picco di artefatti risultante dalla stimolazione elettrica.
Collegare tutti gli elettrodi agli stimolatori e agli amplificatori appropriati. I dati raccolti devono essere registrati su un computer per l'analisi. Impostare i parametri di stimolo della stimolazione unipolare su 0,5 millisecondi, impulsi super massimali da 1 Hertz.
L'ampiezza può variare da 6 a 8 volt. Imposta il tempo di stimolazione dell'interesse su 30 secondi e calcola la media della risposta di 10 stimolazioni consecutive utilizzando la linea di base per raggiungere l'ampiezza di picco. Registra da ogni animale circa una volta alla settimana, se lo desideri. La gestione degli animali è dettagliata nel protocollo di testo.