Valutazione dell'attività attrattiva o repulsiva delle proteine utilizzando i neuroni dell'ippocampo

Inizia con una parabola contenente una matrice di silicio che ha più piccoli canali collegati alle porte di ingresso e uscita.

Iniettare la proteina di prova con attività repulsiva attraverso l'ingresso per riempire i canali.

Incubare per consentire l'adesione delle proteine nell'area del canale, formando le zone proteiche di prova, quindi lavare.

Rimuovere la matrice, sovrapporre l'area rivestita con una proteina di controllo che possiede attività attrattiva e incubare.

Ciò facilita l'aderenza della proteina di controllo alle aree vuote tra le zone proteiche del test, creando zone proteiche di controllo con un motivo a strisce alternate, quindi lavaggio.

Aggiungere la laminina per ricoprire l'area a strisce, quindi lavare.

Seminare l'area rivestita con una sospensione unicellulare di neuroni ippocampali e incubare.

Nella zona delle proteine di prova, i neuroni interagiscono con le proteine, innescando segnali che causano la repulsione dei neuroni, inibendo il loro attaccamento.

Al contrario, le interazioni neurone-proteina nella zona proteica di controllo promuovono l'attaccamento neuronale, supportandone la crescita e l'estensione degli assoni.

Preparare le proteine ricombinanti