JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:59 min. • July 8th, 2025
Prendi una sospensione di citomegalovirus murino, geneticamente modificato per esprimere una proteina fluorescente verde potenziata, che ne consente la visualizzazione.
Caricare la sospensione in una siringa con un ago inserito.
Quindi, anestetizzare un cucciolo di topo mettendolo sul ghiaccio.
Identificare il sito di iniezione sulla testa del cucciolo.
Inserire l'ago perpendicolarmente alla superficie del cranio fino a raggiungere il ventricolo laterale, un liquido cerebrospinale o una cavità riempita di liquido cerebrospinale nel cervello.
Iniettare la sospensione nel ventricolo laterale.
Lascia che il cucciolo si riprenda.
Il virus iniettato circola attraverso il liquido cerebrospinale ventricolare, raggiungendo le cellule ependimali dell'area marginale e le cellule epiteliali del plesso coroideo.
Il virus si attacca ai recettori di superficie di queste cellule, internalizza, subisce la replicazione e si diffonde da una cellula all'altra, stabilendo un'infezione acuta nel plesso coroideo, nell'area marginale e nella zona subventricolare.
Inizia sterilizzando una siringa da 10 microlitri e un ago calibro 27 con alcol al 70%. Quindi, caricare 5 microlitri di soluzione per iniezion
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