JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:47 min. • July 8th, 2025
Prendi una piastra multipozzetto contenente organoidi cerebrali umani in un mezzo di induzione neurale.
Gli organoidi contengono cellule staminali, cellule gliali radiali, cellule progenitrici neurali o NPC e neuroni disposti in uno schema radiale chiamato rosetta, che imita il cervello in via di sviluppo.
Rimuovere il terreno e lavare gli organoidi con un tampone.
Aggiungere il virus Zika sospeso in un tampone ai pozzetti di test e solo tampone ai pozzetti di controllo.
Incubare, permettendo al virus di legarsi ai suoi recettori sugli NPC e di essere internalizzato.
Lavare per rimuovere i virus non internalizzati, quindi aggiungere un nuovo terreno di induzione neurale e incubare.
I virus internalizzati utilizzano il macchinario della cellula ospite per formare nuove particelle virali.
La moltiplicazione virale innesca una risposta cellulare allo stress che induce l'apoptosi, riducendo il numero di NPC disponibili per lo sviluppo di organoidi.
Nel corso del tempo, gli organoidi infetti mostrano dimensioni ridotte e morfologia interrotta, rispecchiando lo sviluppo anormale del cervello negli esseri umani infettati dal virus Zika.
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