JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:28 min. • July 8th, 2025
Prendi le larve di pesce zebra anestetizzate in un piatto foderato con gel di agarosio e assicurati che il cervello sia rivolto verso l'alto per l'iniezione.
Posiziona il piatto sotto un microscopio per visualizzare i ventricoli cerebrali, che sono cavità piene di liquido all'interno del cervello in via di sviluppo.
Prendi un ago per microiniezione contenente una soluzione di lipopolisaccaridi, o LPS, un componente batterico per innescare una risposta immunitaria.
Posiziona l'ago sopra il tettone cerebrale, una regione contenente neuroni e cellule immunitarie residenti, in particolare la microglia.
Pungere il cervello con l'ago e iniettare la soluzione di LPS nel ventricolo.
La microglia nel tessuto circostante si lega all'LPS attraverso i recettori toll-like.
Il legame innesca il rilascio di citochine pro-infiammatorie, che reclutano neutrofili nel sito, portando alla neuroinfiammazione.
I neutrofili generano esplosioni di specie reattive dell'ossigeno e rilasciano enzimi proteolitici, con conseguente morte neuronale.
Trasferire le larve indotte dalla neuroinfiammazione in un terreno di coltura per mantenerle per i saggi a valle.
Impostare il micromanipolatore in modo che la punta
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