JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:59 min. • July 8th, 2025
Prendiamo le sezioni fisse del cervello del topo contenenti cellule neurali, comprese le cellule staminali neurali proliferate marcate con EdU, un analogo della timidina.
Delineare le sezioni con una marcatura idrofobica per prevenire la diffusione della soluzione.
Aggiungere un detergente per permeabilizzare il tessuto. Lavare per rimuovere il detersivo in eccesso.
Aggiungi un fluoroforo per etichettare l'EdU. Rimuovere i fluorofori in eccesso.
Utilizzando un microscopio a fluorescenza, confermare la corretta colorazione delle cellule marcate con EdU.
Applicare un tampone bloccante contenente proteine per prevenire il legame di anticorpi non specifici. Elimina le proteine in eccesso.
Incubare con anticorpi primari che si legano a proteine specifiche nelle cellule staminali neurali. Rimuovere gli anticorpi non legati.
Aggiungere anticorpi secondari coniugati con fluorofori per legare gli anticorpi primari. Lavare via gli anticorpi non legati.
Colorare i nuclei con un colorante e rimuovere il colorante in eccesso.
Rimuovere la marcatura idrofobica, applicare il supporto di montaggio e posizionare un vetrino coprioggetti.
Utilizzando un microscopio confocale, osservare le sezioni per
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici