Danneggiare meccanicamente i nervi segmentali delle larve di Drosophila per indurre la neurodegenerazione

Prendi le larve di Drosophila di terzo stadio e anestetizzale usando l'anidride carbonica.

Al microscopio, posizionare le larve con la superficie ventrale rivolta verso l'alto per visualizzare i nervi segmentali.

Questi nervi contengono motoneuroni che innervano i muscoli della parete corporea e controllano il movimento larvale.

I terminali assonici di questi neuroni si collegano con le fibre muscolari per formare giunzioni neuromuscolari o NMJ.

I neuroni rilasciano neurotrasmettitori che si legano ai recettori sulle fibre muscolari, causando l'afflusso di ioni e innescando la trasmissione del segnale.

Usando una pinza, pizzicare la cuticola ventrale per ferire i nervi segmentali, inibendo così il movimento.

Metti le larve ferite su un piatto di agar con cibo larvale per garantire la sopravvivenza.

Metti il piatto in un piatto, coprilo con un tovagliolo di carta umido per mantenere l'umidità e conservalo in un contenitore per consentire il recupero delle larve.

Con il tempo, la lesione porta alla morte del motoneurone, nota come neurodegenerazione, che interrompe gli NMJ.

Posizionare ogni larva su un apparecchio anestetizzante di CO₂. Sotto un microscopio da dissezione, arrotolare