JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:13 min. • July 8th, 2025
Iniziate con un ratto anestetizzato, disinfettate la sua testa rasata e fissatela in un apparecchio stereotassico.
Fai un'incisione sulla linea mediana per esporre il cranio.
Segna due posizioni sul cranio e pratica piccoli fori.
Collegare una siringa con virus chimerici contenenti RNA ecotropico dell'HIV all'interno di un vettore lentivirale all'apparato stereotassico.
Inserisci l'ago nel foro, mirando alle cellule della corteccia cerebrale, inclusa la microglia, le cellule immunitarie del cervello.
Iniettare lentamente i virus per la loro distribuzione uniforme nella corteccia.
Dopo l'iniezione, sutura l'incisione, disinfetta l'area e consenti al ratto di riprendersi.
Il virus iniettato interagisce con i recettori delle cellule cerebrali, si fonde e rilascia l'RNA dell'HIV nel citoplasma.
L'RNA viene trascritto inversamente in DNA e si integra nel DNA della cellula.
La cellula infetta esprime i componenti virali, producendo nuovo RNA e proteine.
Questi si assemblano e vengono rilasciati come nuovi virus, che aumentano la carica virale nel cervello, stabilendo un'infezione attiva da HIV.
Per l'iniezione di EGFP EcoHIV, dopo aver confermato la mancanza di risposta al riflesso del p
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