Un modello in vitro di lesione da stiramento in neuroni derivati da cellule staminali pluripotenti indotte umane

Inizia con una piastra senza fondo a più pozzetti attaccata a una membrana di silicone. La membrana è rivestita con un biopolimero per facilitare l'adesione cellulare.

Introdurre nei pozzetti neuroni derivati da cellule staminali pluripotenti indotte umane, o hiPSCN, sospesi in un mezzo. Il terreno è integrato con matrice extracellulare o proteine ECM per migliorare l'adesione cellulare.

Incubare la piastra, permettendo alle cellule di aderire alle proteine della ECM e al biopolimero, favorendo un'interazione uniforme con la superficie della membrana.

Quindi, fissare la placca sul tavolino di un dispositivo per lesioni.

Utilizzando il dispositivo, applicare una rientranza sulla membrana per generare uno stress meccanico controllato sui neuroni.

Lo stress interrompe il citoscheletro, causando la degenerazione delle sporgenze cellulari chiamate neuriti e la formazione di piccoli rigonfiamenti lungo i neuriti.

Lo stress danneggia anche l'integrità della membrana cellulare, con conseguente morte cellulare.

Gli hiPSCN che mostrano un fenotipo di lesione da stiramento sono ora pronti per l'analisi.

Per allungare la piastra, modificare i campi "Nome file" e "Percorso file" nello strumento