Generazione di un modello murino con un'infezione del sistema nervoso centrale

Inizia con due siringhe riempite con diversi volumi di terreno contenenti i virus bersaglio dell'infezione del sistema nervoso centrale (SNC).

Mantieni il cucciolo di topo in posizione prona. Disinfettare la testa e iniettare il volume più piccolo della soluzione virale per via intracerebrale attraverso la regione lambda.

Ciò consente ai virus di aggirare la barriera emato-encefalica e raggiungere direttamente il tessuto cerebrale.

Quindi, tieni il cucciolo di topo in posizione supina. Disinfettare e iniettare il volume maggiore della soluzione virale nell'addome.

Ciò facilita la diffusione sistemica del virus attraverso i vasi sanguigni, infettando altre parti del SNC.

I virus iniettati entrano nelle cellule neuronali e utilizzano il macchinario ospite per replicarsi, portando alla morte cellulare.

I virus attivano anche il sistema immunitario, causando l'infiammazione del SNC e stabilendo un modello di infezione del SNC.

Prima di iniziare la procedura di infezione, diluire il ceppo di virus dengue non adattato 2 a 1 volte 10 fino alla quinta unità di formazione della placca per 40 microlitri di RPMI 1640 media concentrazione. Successivamente, caricare una siringa da 10,3 millilitri dotata di un ago calibro 30 con 10 microlitri di virus diluito e una siringa da 10,3 millilitri dotata di un ago calibro 30 con 30 microlitri di virus per animale.

Per la somministrazione intracerebrale del virus, premere l'oracolo tra il pollice e l'indice per trattenere delicatamente un topo dell'Institute of Cancer Research di sette giorni in posizione prona e iniettare il volume di 10 microlitri di virus diluito nell'area lambda all'intersezione della sutura sagittale e lambdoide. Dopo l'iniezione intracerebrale, utilizzare il pollice e l'indice per tenere il topo in posizione supina e iniettare delicatamente intraperitonealmente il volume di 30 microlitri di virus diluito nell'addome murino.