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Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:56 min • July 8th, 2025
Inizia con una siringa contenente cellule T-helper o Th17 in grado di riconoscere una proteina acquaporina-4 degli astrociti nel SNC, compreso il midollo spinale, che svolge un ruolo nella trasmissione del segnale al cervello.
Iniettare queste cellule Th17 nella vena caudale di un topo trattenuto. Le cellule entrano nel flusso sanguigno e circolano in tutto il corpo.
Contemporaneamente, somministrare per via intraperitoneale una tossina batterica derivata dalla Bordetella pertussis.
La tossina disturba la barriera endoteliale dei vasi sanguigni e consente alle cellule Th17 di infiltrarsi nel midollo spinale.
Le cellule Th17 infiltrate interagiscono con gli astrociti che esprimono l'acquaporina-4 e si attivano.
Queste cellule attivate rilasciano citochine pro-infiammatorie, che causano l'infiltrazione di cellule immunitarie mononucleate, compresi i macrofagi.
I macrofagi rilasciano molecole infiammatorie che danneggiano la guaina mielinica delle fibre nervose circostanti.
Questa demielinizzazione interrompe la trasmissione del segnale nervoso, portando a rigidità della coda e movimento limitato degli arti posteriori, indicando l'insorgenza di paralisi.
Entro un'ora dalla raccolta, trasferire le cellule in una siringa da 1 millilitro e somministrare 200 microlitri di cellule a ciascun animale ricevente per via endovenosa attraverso la vena caudale. Quindi, iniettare immediatamente ogni topo per via intraperitoneale e due giorni dopo, con 200 nanogrammi di tossina B. pertussis diluiti in 200 microlitri di PBS.