JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
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Prendiamo i nematodi transgenici che vengono mantenuti allo stesso stadio di sviluppo.
Le cellule muscolari della parete corporea di questi nematodi esprimono proteine simili ai prioni, che sono marcate con una proteina fluorescente rossa e localizzate all'interno di vescicole acide.
Le proteine simili ai prioni sono proteine aggreganti mal ripiegate associate a malattie neurodegenerative.
Successivamente, trasferire i nematodi su un tampone di agarosio contenente nanoparticelle polimeriche e una soluzione anestetica.
Gli effetti combinati delle nanoparticelle e della soluzione anestetica immobilizzano i nematodi sul cuscinetto di agarosio.
Posizionare un vetrino coprioggetti sul tampone di agarosio e sigillarlo.
A questo punto, posizionare il gruppo tampone di agarosio con i nematodi al microscopio confocale e impostare i parametri di imaging appropriati.
Acquisire immagini time-lapse delle proteine marcate con fluorescenza all'interno dei nematodi per monitorare il trasporto vescicolare delle proteine simili ai prioni all'interno e tra le cellule muscolari della parete corporea.
Dopo aver preparato linee transgeniche sincronizzate di controllo e dominio prionico di C. elegans e t
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