Generazione di un modello murino di lesione cerebrale traumatica utilizzando un dispositivo a percussione fluida laterale

Prendi un topo anestetizzato e applica un unguento per evitare che gli occhi si secchino.

Radere la testa, disinfettare il cuoio capelluto e incidere sul piano sagittale per esporre il cranio.

Rimuovere lo strato di tessuto connettivo e contrassegnare l'area target per lesioni.

Trapano per creare un lembo osseo, quindi rimuovilo per esporre la dura madre, il rivestimento esterno del cervello.

Posizionare una cannula sulla dura madre e fissarla con cemento dentale.

Riempire la cannula con soluzione fisiologica, assicurandosi che non si formino bolle d'aria, e collegarla al tubo del dispositivo di percussione laterale del fluido, contenente un pendolo e un serbatoio pieno di liquido.

Rilascia il pendolo da un angolo calibrato per colpire il serbatoio, generando un impulso di pressione che viaggia attraverso il fluido e raggiunge il cervello.

Lo stress meccanico danneggia i neuroni, causando lesioni cerebrali traumatiche.

Rimuovere la cannula, suturare l'incisione e consentire al topo di riprendersi per ulteriori analisi.

Per l'induzione di lesioni cerebrali traumatiche, confermare la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi in un topo anestetizzato e applicare un unguento sugli occhi dell'animale. Dopo la rasatura, disinfettare la pelle esposta del cuoio capelluto con etanolo al 70% prima di incidere il cuoio capelluto su un piano sagittale. Usando una pinza, ritrarre l'incisione su entrambi i lati e separare leggermente il periostio.

Usa un pennarello per disegnare un cerchio di 3 millimetri di diametro sull'area parietale destra del cranio, a 2 millimetri di distanza dalla linea mediana. Usa un trapano elettrico per penetrare con cura nel cranio senza danneggiare la dura. Rimuovere il lembo osseo per esporre una finestra ossea di 3 millimetri e posizionare una cannula di plastica per lesioni sopra la craniotomia.

Dopo aver cementato la cannula al cranio con acrilico dentale, utilizzare una siringa da 5 millilitri per riempire la cannula con soluzione fisiologica sterile allo 0,9%, facendo attenzione a evitare bolle. Accendere l'oscilloscopio e l'amplificatore. Verificare che il tubo ad alta pressione del dispositivo di ingresso laterale della percussione del fluido sia privo di bolle d'aria ed erogare circa 10 impulsi di prova fino a quando il dispositivo non emette un segnale costante.

Regolare l'angolo della posizione iniziale del pendolo per raggiungere un'intensità dell'impulso di circa due atmosfere standard e collegare la cannula di ingresso al dispositivo di lesione a percussione del fluido laterale. Premi il grilletto per rilasciare il pendolo, inducendo la lesione cerebrale. Quindi ottenere e trasmettere un impulso alla dura madre attraverso l'intero sistema di tubi chiusi riempiti di fluido.

Dopo l'induzione della lesione cerebrale, rimuovere la cannula e suturare l'incisione. Quindi, posizionare il mouse su un termoforo con monitoraggio fino a quando non è deambulante, prima di riportare l'animale nella sua gabbia di casa con accesso ad libitum a cibo e acqua.