Modellazione dell'emorragia intraventricolare neonatale attraverso l'iniezione intraventricolare di emoglobina
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:51 min. • July 8th, 2025
Fissare un cucciolo di ratto anestetizzato su un telaio stereotassico. Disinfettare la testa e incidere per esporre il cranio.
Identificare il bregma, un punto di riferimento anatomico, per localizzare i ventricoli laterali, cavità piene di liquido cerebrospinale nel cervello.
Le cellule epiteliali del plesso coroideo e le cellule ependimali rivestono i ventricoli, formando una barriera dallo spazio periventricolare.
Utilizzare una microsiringa per iniettare l'emoglobina in un ventricolo, imitando l'emorragia intraventricolare.
Ritira l'ago, chiudi l'incisione e lascia che il cucciolo si riprenda.
L'emoglobina iniettata subisce una degradazione, rilasciando eme e generando specie reattive dell'ossigeno o ROS.
I ROS ossidano i lipidi e le proteine della membrana cellulare, causando la morte cellulare e interrompendo la barriera, che consente all'eme di entrare nello spazio periventricolare.
Le cellule immunitarie residenti nei tessuti riconoscono l'eme libero come un segnale di pericolo e rilasciano citochine proinfiammatorie per reclutare ulteriori cellule immunitarie, che danneggiano i tessuti cerebrali vicini.
La perdita di tessuto periventricolare porta all'ingrossamento ventric
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