JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:33 min. • July 8th, 2025
Inizia con un ratto trattenuto e anestetizzato con un'arteria carotide comune destra suturata in modo lasco, o CCA, nella regione del collo.
Questo CCA si ramifica nell'arteria cerebrale media, o MCA, fornendo sangue ossigenato al cervello.
Riposizionare il ratto lateralmente e praticare un'incisione tra l'occhio destro e l'orecchio.
Ritrarre la pelle e sezionare il muscolo per esporre il cranio. Posizionare un gocciolatore salino e un aspiratore per il lavaggio.
Forare il cranio e rimuovere il lembo osseo. Quindi, tagliare lo strato protettivo per esporre l'MCA.
Usando una pinza per diatermia, applicare calore per coagulare l'MCA destro in più punti, quindi tagliarlo nel punto di attraversamento delle vene.
La coagulazione provoca l'occlusione arteriosa, riducendo il flusso sanguigno ossigenato al cervello, induce ischemia e porta alla morte neuronale.
Copri il cervello esposto.
Esporre nuovamente il collo, quindi legare saldamente il CCA destro. Ciò impedisce il flusso sanguigno permanente all'MCA e intensifica l'ischemia.
Incidere la pelle nel punto medio tra l'orbita destra e il canale uditivo esterno. Successivamente, seziona smussamente il muscolo temporale per rivelare il cranio. Quindi, utilizzando fino a cinque divaricatori elastici da 3 millimetri, ritrarre e fissare la pelle alla tavola di sughero. Quindi, posizionare una flebo di soluzione salina regolata dalla gravità sopra il sito aperto nel punto più alto del cranio vicino all'orecchio e impostare un sistema di aspirazione con un ugello nel punto più basso per rimuovere eventuali detriti ossei e per eliminare eventuali sanguinamenti minori dal sito esposto.
Regolare la rotella per visualizzare la fonte di sanguinamento, se necessario. Ora, usa un trapano dentale con una fresa grossolana da 1,6 millimetri rivestita di diamante a circa 8.000 giri/min per eseguire una craniotomia di 5 millimetri per 5 millimetri sulla regione esposta, avendo cura di applicare una pressione circolare e laterale ma non verso il basso durante la perforazione. Quando diventa completamente trasparente, usa una pinza per rimuovere l'osso. Quindi, utilizzando un uncino durale fatto in casa, aprire con cura la dura, facendo attenzione a evitare di rompere i grandi vasi sanguigni superficiali.
Successivamente, utilizzare un paio di pinze per diatermia angolate da gioielliere con punte appuntite da 0,25 millimetri per coagulare l'MCA dal punto in cui la vena cerebrale inferiore si incrocia fino al punto della biforcazione dell'arteria e quindi lungo il ramo caudale dell'MCA, fino a quando i vasi non sono completamente occlusi. Quindi, per confermare che l'occlusione è completa, utilizzare le forbici microvascolari per tagliare la sezione dell'MCA occluso che si trova sotto il punto in cui la vena cerebrale inferiore attraversa l'MCA. Ora, copri l'area esposta con una garza imbevuta di soluzione salina e riporta il ratto in posizione supina. Riaprire la sutura legata in modo lasco sul collo per riesporre le arterie carotidi e fare un nodo nella sutura attorno all'arteria sullo stesso lato dell'MCA occluso per legare permanentemente il vaso.