JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:55 min. • July 8th, 2025
Posizionare una larva di Drosophila anestetizzata con la testa rivolta verso l'alto su una goccia d'olio su un vetrino contenente macchie di grasso sottovuoto.
Posiziona un vetrino coprioggetti e premilo delicatamente per entrare in contatto con la larva.
Regolare la larva per esporre la regione contenente i neuroni bersaglio che esprimono proteine fluorescenti.
Fissare il vetrino su un microscopio a due fotoni.
Usa un laser a bassa potenza per ridurre al minimo i danni e scansiona la larva per localizzare la regione con i neuroni bersaglio fluorescenti.
Quindi, regolare la finestra di scansione per concentrarsi sulla regione target contenente gli assoni, un tipo di proiezioni neuronali.
Ora, riduci la velocità di scansione e aumenta la potenza del laser.
Il laser ad alta potenza colpirà gli assoni mirati, generando calore localizzato che li danneggia e migliora la fluorescenza intorno al sito della lesione.
Infine, torna alla modalità laser a bassa potenza. La presenza di piccole strutture ad anello nel sito della lesione conferma il successo del danno neuronale.
Inizia con l'anestetizzazione delle larve. In una cappa aspirante, posizionare una capsula di vetro da 60 millimetri in
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