JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:14 min. • July 8th, 2025
Le regioni del locus coeruleus, situate bilateralmente nel tronco cerebrale del topo, contengono neuroni produttori di noradrenalina e regolano varie regioni del cervello.
Per rilevare queste regioni del locus coeruleus, iniziare con un vetrino che trasporta le sezioni fisse e crioconservate del tronco cerebrale del topo.
Lavare il vetrino con un tampone per rimuovere le tracce di fissativo.
Aggiungere un tampone contenente detersivo e incubare per permeabilizzare le membrane, quindi lavare.
Introdurre anticorpi primari specifici per l'enzima dopamina β-idrossilasi, che converte la dopamina in noradrenalina, un neurotrasmettitore.
Incubare per consentire agli anticorpi di interagire con la dopamina β-idrossilasi.
Lavare per rimuovere gli anticorpi non legati.
Quindi, aggiungere anticorpi secondari verdi accoppiati a fluorofori e incubare al buio.
Gli anticorpi secondari si legano agli anticorpi primari e poi vengono lavati.
Aggiungere il mezzo di montaggio alle sezioni del cervello, quindi coprire e asciugare.
Osservare i vetrini al microscopio a fluorescenza.
La fluorescenza verde che rappresenta i neuroni produttori di noradrenalina marcati nelle sezioni cerebrali indica la prese
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici