JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:48 min. • July 8th, 2025
Assumere mosche adulte anestetizzate di Drosophila in una fiala vuota.
Inserisci un batuffolo di cotone nella fiala per confinare le mosche sul fondo, garantendo un impatto più forte quando infliggi lesioni.
Una volta che le mosche si sono riprese dall'anestesia, collegare la fiala alla molla del dispositivo per traumi ad alto impatto.
Appoggiare l'estremità della fiala su una piattaforma rialzata. Quindi, tirare indietro la molla ad angolo e rilasciarla.
La fiala colpisce la piattaforma, facendo scontrare ripetutamente le mosche contro le pareti della fiala.
Il cervello della drosofila colpisce la capsula cranica, imitando la lesione cerebrale traumatica a testa chiusa, o TBI, senza causare danni esterni.
Lascia che le mosche si riprendano e trasferiscile in una fiala con il cibo.
La lesione provoca danni alle membrane neuronali, compromettendo la funzione neuronale.
Le molecole di segnalazione dei neuroni danneggiati reclutano le cellule immunitarie, portando alla progressiva degradazione del tessuto cerebrale, con conseguente morte dei moscerini.
Metti da 1 a 60 mosche anestetizzate con anidride carbonica in una fiala vuota e tappala con un batuffolo di cotone aderente. Quindi, disegna una linea sulla fiala, a 1 pollice dalla sua base. Abbatti le mosche dai lati della fiala e spingi il batuffolo di cotone finché non corrisponde alla linea appena tracciata.
Attendi cinque minuti affinché le mosche recuperino la mobilità dall'anidride carbonica. Quindi, inserire l'estremità della molla nella fiala fino a quando il bordo interno del Velcro non è a filo con la parte superiore della fiala. In questo modo la fiala si fissa alla molla creando un raccordo a compressione stretto. Con la molla appoggiata in piano, assicurarsi che 1 pollice della fiala si sovrapponga alla regione rialzata del coperchio del secchio del ghiaccio.
A questo punto, indossare una protezione per l'udito perché l'impatto della fiala contro il coperchio del secchiello del ghiaccio produce un forte rumore. Quindi, tenere la fiala nella regione del Velcro usando il pollice e l'indice della mano sinistra. Con la mano destra, tieni la tavola ben stretta al piano del banco.
Quindi, tirare la molla perfettamente dritta all'angolazione desiderata, quindi rilasciare la molla. Attendere che la molla si fermi completamente, quindi rimuovere la fiala dalla molla. Posizionare la fiala sul piano di lavoro e lasciare che le mosche si riprendano per almeno cinque minuti. Durante questo periodo le mosche riacquisteranno lentamente il loro normale movimento. Quindi, trasferisci le mosche in una fiala con cibo per mosche per un'analisi successiva.