Modello di invasione tumorale basato su matrice utilizzando la co-coltura del glioblastoma della microglia

Inizia aggiungendo una sospensione fredda di glioblastoma e cellule microgliali, ciascuna colorata con un colorante fluorescente distinto, in una soluzione di matrice polimerica fredda.

La condizione di freddo impedisce la polimerizzazione prematura della matrice.

Quindi, trasferire la miscela in un inserto a camera porosa all'interno di una piastra di coltura.

Incubare per consentire la polimerizzazione della matrice, formando un gel che incorpora le cellule.

Aggiungere il terreno privo di siero all'inserto e il terreno di coltura contenente siero al pozzetto sottostante, quindi incubare.

I fattori chimici nel siero promuovono la migrazione cellulare verso i terreni ricchi di siero.

Inoltre, le microglia secernono molecole di segnalazione che interagiscono con le cellule di glioblastoma.

Ciò migliora la migrazione delle cellule di glioblastoma verso la parte inferiore dell'inserto poroso, simile alla loro migrazione da un tumore al tessuto circostante.

Rimuovere le celle dalla parte superiore della camera.

Ora, fissare le cellule rimanenti con un fissativo e lavarle con un tampone. La distinta fluorescenza delle cellule aiuta a tracciare la migrazione cellulare.

Scongelare la misc