Infezione da virus Zika delle cellule staminali neurali fetali
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:21 min. • July 8th, 2025
Prendiamo una sospensione del virus Zika, un virus patogeno, avente la molteplicità desiderata di infezione, il rapporto tra particelle virali e cellule.
Mescolare la sospensione virale con cellule staminali neurali cerebrali fetali umane.
Incubare la miscela, permettendo al virus di legarsi ai recettori sulle cellule, facilitando l'endocitosi virale.
Successivamente, centrifugare la miscela e scartare il surnatante contenente particelle virali non internalizzate.
Risospendere le cellule infettate dal virus in un terreno e seminarle in una piastra multipozzetto rivestita di proteine della matrice extracellulare, consentendo l'adesione cellulare.
Incubare la piastra.
Il virus Zika internalizzato utilizza il macchinario della cellula ospite per produrre nuove particelle virali.
La replicazione virale altera significativamente la morfologia cellulare, causando danni cellulari e facilitando la diffusione dell'infezione alle cellule vicine.
Le cellule infettate dal virus Zika possono essere utilizzate per ulteriori analisi.
Risospendere il pellet nel calcio ZIKV a una molteplicità di infezione, o MOI, compresa tra 1 e 10. Il volume della soluzione ZIKV non deve superare 0,5 millilitri.
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