JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
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Inizia con un inserto di membrana contenente cellule endoteliali microvascolari cerebrali di topo, simile a una barriera emato-encefalica in vitro.
Posizionare questo inserto in un pozzetto dello strumento a resistenza elettrica transendoteliale o TEER contenente un elettrodo incorporato.
Aggiungere nuovi supporti nello scomparto inferiore.
Posizionare il coperchio con gli elettrodi sui pozzetti TEER, quindi inserire lo strumento in un'incubatrice e collegarlo a un sistema di registrazione.
Gli elettrodi generano una corrente elettrica attraverso lo strato cellulare per la misurazione della resistenza transendoteliale.
Le proteine giunzionali intatte tra le cellule ostacolano il flusso di corrente, con conseguente aumento del valore TEER.
Scollegare lo strumento e rimuoverlo.
Smontare il coperchio, rimuovere un po' di terreno dallo scomparto superiore e aggiungere le cellule T preattivate. Rimontare lo strumento per la misurazione TEER.
Le cellule T attivate interagiscono con le cellule endoteliali, rilasciando fattori infiammatori ed enzimi citolitici, interrompendo l'integrità giunzionale.
Questa interruzione aumenta il flusso di corrente elettrica, con conseguente riduzione del
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