Valutazione della compromissione motoria nei modelli di C. elegans utilizzando il saggio di locomozione radiale

Prendiamo le piastre di Petri contenenti una distribuzione uniforme del cibo per vermi sui terreni di crescita dei nematodi.

Capovolgi ogni piatto e segna il centro.

Usando un microscopio, introdurre i vermi Caenorhabditis elegans nel punto contrassegnato centralmente.

Quindi, introdurre vermi di età corrispondente sulle piastre rimanenti.

Questi vermi esprimono le forme wild-type o mutanti di una proteina che lega l'RNA umano, che forma aggregati tossici nel citoplasma neuronale e porta alla morte neuronale.

Ciò riduce la capacità dei vermi di controllare i movimenti muscolari, con conseguente compromissione della funzione motoria.

Consenti ai vermi di strisciare per un determinato periodo.

Usando un microscopio, segna la posizione finale di ogni verme.

Misurare la distanza radiale percorsa dalle viti senza fine dal punto centrale alle loro posizioni finali.

Rispetto ai controlli, i vermi che esprimono livelli più bassi della proteina wild-type mostrano una lieve compromissione motoria, quelli con livelli più elevati della proteina wild-type mostrano una compromissione moderata e quelli con la proteina mutante mostrano una grave compromissione.

Capovolgere le piastre del saggio NG