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A Stereotactically Guided Ablation Technique for Auditory Cortex Removal in Rats

Una tecnica di ablazione stereotassicamente guidata per la rimozione della corteccia uditiva nei ratti

Protocol
335 Views
05:08 min
July 8, 2025
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Transcript

Prendete un ratto anestetizzato fissato in una cornice stereotassica.

Radere e disinfettare il cuoio capelluto, quindi praticare un'incisione per esporre il cranio.

Identifica i riferimenti anatomici, il bregma, la lambda e la linea interaurale per localizzare la corteccia uditiva, la regione del cervello che elabora i segnali sonori.

Incidere e ritrarre il muscolo temporale, rivelando l'osso temporale.

Posiziona un ago nel punto medio della linea interaurale. Usando questo punto di riferimento, determina le coordinate sopra la corteccia uditiva.

Forare la regione contrassegnata e rimuovere l'osso per esporre il cervello.

Taglia le meningi, gli strati che ricoprono il cervello.

Eseguire l'ablazione aspirando gli strati corticali preservando la sostanza bianca. La rimozione della corteccia uditiva interrompe la capacità di elaborazione del segnale sonoro.

Sostituire l'osso asportato, applicare una garza per controllare il sanguinamento e suturare la pelle.

Applicare un unguento antibiotico per prevenire l'infezione e somministrare analgesici sottocutanei per alleviare il dolore.

Consentire al ratto di riprendersi per valutare l'impatto dell'ablazione.

Per iniziare questa procedura, posizionare il ratto anestetizzato su un termoforo per mantenere la sua temperatura corporea. Quindi stabilizzare la testa dell'animale in un telaio stereotassico utilizzando due barre auricolari e una barra per il morso. Radere il cuoio capelluto e disinfettare l'area chirurgica con iodio povidone.

Usando un bisturi, praticare un'incisione lungo la linea mediana per esporre il cranio e ritrarre il periostio che copre la superficie del cranio. Successivamente, utilizzare una punta di cotone sterile per rimuovere delicatamente il sangue che copre la superficie del cranio al fine di visualizzare il bregma, la lambda e la linea interaurale. Praticare un'incisione nel muscolo temporale vicino alla sua inserzione dorsale sul cranio con un bisturi. Successivamente, estrarre il muscolo utilizzando un ago e un materiale di sutura e fissare il materiale di sutura al telaio stereotassico per esporre l'osso temporale.

Abbassare lentamente un ago dritto sterile fino a quando non si trova proprio sopra la superficie del cranio, in modo che la punta dell'ago sia impostata sullo zero interaurale. Impostate questo punto su zero. Successivamente, punta all'AC usando quattro punti. Quindi abbassa l'ago proprio sopra l'osso temporale per visualizzare ciascuno di questi quattro punti. Segna i punti con un pennarello sull'osso temporale e collegali in modo da disegnare un rettangolo. Il rettangolo servirà da guida per aprire una finestra nell'osso.

In questa procedura, aprire la finestra utilizzando un trapano elettrico e una piccola punta da trapano. Forare il perimetro del rettangolo a 8.000 giri/min fino a quando l'osso non cede. Raffreddare la superficie di foratura risciacquandola con soluzione fisiologica sterile fredda per evitare danni alle strutture sottocorticali. Quando l'osso cede, fai attenzione a non perforare il cervello.

Quando i bordi sono allentati, sollevare l'osso di copertura con una pinza fine e conservarlo in soluzione salina fredda e sterile. Utilizzando un microscopio operatorio, tagliare delicatamente le meningi con un bisturi microchirurgico e rimuoverle utilizzando due pinze a punta fine. In caso di sanguinamento, sciacquare il sito chirurgico con soluzione fisiologica sterile fredda.

Quindi, aspirare delicatamente l'aria condizionata utilizzando un dispositivo di aspirazione chirurgica accoppiato a un ago sterile a punta smussata calibro 20. Aspirare solo i sei strati corticali e non la sostanza bianca sottostante. Questo punto è critico e deve essere eseguito con molta attenzione. Al termine dell'aspirazione, coprire il sito chirurgico con l'osso estratto e applicare una garza emostatica riassorbibile.

Lascia che il muscolo temporale recuperi la sua posizione originale, quindi sutura la pelle usando clip per ferite. Successivamente, applica un unguento antibiotico sulla ferita. Successivamente, iniettare buprenorfina per via sottocutanea nella parte posteriore del ratto come analgesico, un'ora e otto ore dopo la fine dell'intervento. Tieni l'animale sul termoforo fino a quando non si sveglia e rimettilo nella sua gabbia per il recupero.

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