JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:42 min. • July 8th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato e fissato.
Rimuovere i peli dal collo del topo e disinfettare il sito chirurgico.
Fai un'incisione sul collo e ritrai il muscolo sottostante e la trachea per esporre l'arteria carotide comune destra.
L'arteria carotide fornisce il sangue ossigenato al cervello.
Fai due nodi attorno all'arteria per limitare il flusso sanguigno verso l'alto.
Sutura l'incisione e trasferisci il topo in una camera a basso contenuto di ossigeno. Inserire una sonda rettale per monitorare la temperatura corporea, quindi regolare il calore lamp per mantenere la temperatura appropriata.
Il basso livello di ossigeno nella camera riduce i livelli di ossigeno nel sangue del topo, creando una condizione di ipossia.
Con la sutura dell'arteria carotide, l'apporto di sangue e ossigeno al cervello si riduce ulteriormente. Questo porta all'ischemia, che provoca danni neuronali.
A poco a poco, i componenti del sangue aderiscono alla parete del vaso, formando un coagulo o un trombo.
Questo ostruisce il flusso sanguigno, aumentando il danno neuronale e inducendo un ictus trombotico.
Posizionare un topo maschio C57 black 6 di 10-13 settimane, di 22-30 grammi, sul letto chirurgico. Dopo aver confermato l'anestesia con un pizzico di punta, applicare un unguento sugli occhi dell'animale. Allungare i quattro arti lungo il paranuca e fissarli con del nastro adesivo.
Quindi, utilizzando una crema depilatoria, rimuovere il pelo sul collo dell'animale e pulire il sito chirurgico. Ora sposta il letto chirurgico sotto un microscopio da dissezione e fai un'incisione cervicale destra di 0,5 centimetri nella pelle lungo la linea mediana. Usando un paio di pinze sottili, separa la trachea e il muscolo per esporre l'arteria carotide comune destra e posiziona due suture di seta 5-0 pretagliate sotto l'arteria. Fare attenzione a separare l'arteria carotide dal nervo vago.
Nodo vivo a suture di seta 5-0 pretagliate e sganciabili sull'RCCA. Quindi utilizzare suture monofilamento di nylon 4-0 per chiudere la pelle e trasferire rapidamente il mouse al sistema di ipossia.
Posizionare la maschera facciale sul naso e sulla bocca dell'animale e una sonda rettale, in modo da mantenere una temperatura corporea di 37,5 gradi Celsius durante il parto di ipossia. Regolare il calore lamps.