Modellazione di lesioni ripetitive alla testa da commozione cerebrale in un modello murino

Inizia attaccando la punta d'impatto e la punta della sonda a un dispositivo d'impatto.

Quindi, fissa un mouse anestetizzato in una cornice stereotassica.

Posiziona la punta d'impatto tra le suture interfrontali e lambdoidi, allineata verticalmente con una linea orizzontale immaginaria tra le orecchie.

Azzerare i canali X e Y sul pannello di controllo stereotassico per evitare lo spostamento del centro dell'impatto quando si cambiano le punte.

Sposta manualmente la punta della sonda sul centro dell'impatto e abbassala per toccare il punto dell'impatto. Aggancia un sensore di contatto alla coda del mouse.

Azzerare il canale Z, poi riposizionare la punta d'impatto fino a quando X e Y sono zero e Z legge meno quattro.

Applica l'impatto a una velocità specifica.

Misura l'apnea, il tempo che intercorre tra l'impatto e il primo respiro del topo, per determinare la gravità della lesione.

Consenti al mouse di recuperare.

Ripeti l'impatto a intervalli specificati. Impatti ripetuti rompono i vasi sanguigni nel cervello, causando microsanguinamenti e innescando l'attivazione degli astrociti, imitando una lieve commozione cerebrale simile a quella umana.

Inizia attaccando una punta metallica rivestita in gomma siliconica su misura a un dispositivo di impatto stereotassico elettromagnetico. Fare attenzione che la parte inferiore piatta della punta rivestita sia parallela alla superficie della punta della sonda del dispositivo di impatto. Quindi, posiziona un mouse anestetizzato in posizione prona su un termoforo e conferma la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi.

Quindi, usa un tagliacapelli per radere completamente la testa e applica un unguento sugli occhi dell'animale. Quando l'animale è pronto, preimpostare la velocità del dispositivo di impatto a 4 metri al secondo e il tempo di permanenza a 240 millisecondi sulla scatola di controllo. Posiziona un morbido termoforo sotto il corpo dell'animale, per mantenere la temperatura corporea vicino ai 39 gradi Celsius.

Quindi, utilizzare le barre auricolari con estremità smussate per montare il mouse nel telaio stereotassico, in posizione prona. Utilizzare il driver z per abbassare la punta d'impatto, vicino alla testa del mouse. Spostare i driver x e y, a metà strada rispetto alle coordinate target, sopra la sutura sagittale, per regolare la punta piatta dell'impatto di 9 millimetri di diametro.

Facendo attenzione che un bordo della punta d'impatto, sia verticalmente parallelo a una linea orizzontale immaginaria, tracciata tra le due orecchie. Per impostare correttamente la profondità di impatto, per prima cosa, impostare i canali x e y sul pannello di controllo stereotassico digitale su zero, per assicurarsi che non vi sia alcuno spostamento del centro di impatto dopo aver cambiato le punte.

Quindi, spostare la punta della sonda aggiuntiva sul sito di impatto del cervello del topo. Regolare manualmente i driver x e y per spostare la punta della sonda al centro dell'area di impatto e agganciare un sensore di contatto alla coda. Utilizzare il driver z per spostare l'impattatore verso il basso, fino a quando la punta della sonda non tocca la superficie del sito di impatto, e impostare il canale z sul pannello di controllo stereotassico su zero.

Quindi, utilizzare i driver x e y per riportare manualmente la punta di impatto nell'area di impatto, fino a quando i driver x e y non sono zero. Quindi, spostare l'unità z verso il basso fino a quando il pannello di controllo che mostra il driver z non è a 4.00 negativo. E spostare l'interruttore di retrazione sulla scatola di controllo per ritrarre l'attuatore.

Ora, fai clic sull'interruttore dell'impatto sulla casella di controllo per attivare un impatto con una profondità di deformazione di 4 millimetri e usa un timer per misurare il tempo dall'impatto fino al primo respiro del mouse. Quindi, trasferisci l'animale in un tappetino caldo, monitorandolo fino a quando non si è completamente ripreso.