Analisi LC-MS/MS del profilo proteomico di granuli di neuromelanina isolati da tessuto cerebrale umano

Inizia con peptidi derivati da granuli di neuromelanina (NMG) isolati da tessuto cerebrale umano post mortem.

NMG, che si trovano nei neuroni che producono dopamina, contengono pigmenti di neuromelanina, proteine e lipidi.

Prendi una colonna di cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) contenente una fase stazionaria a base di silice funzionalizzata con ligandi idrofobici.

Carica i peptidi sulla colonna.

I peptidi idrofobici si legano più fortemente alla colonna rispetto a quelli idrofili.

Passa un buffer di eluizione attraverso la colonna.

I peptidi meno idrofobici eluiscono per primi, mentre quelli più idrofobici eluiscono dopo.

I peptidi eluiti entrano nella sorgente di ionizzazione elettrospray dello spettrometro di massa, dove vengono ionizzati in ioni peptidi carichi.

I peptidi ionizzati entrano quindi nell'analizzatore di massa, dove vengono separati in base al loro rapporto massa-carica.

Uno ione peptidico selezionato viene diretto verso la cella di collisione e frammentato in ioni più piccoli, i cui rapporti massa-carica vengono misurati di nuovo.

Infine, i dati vengono confrontati con un database di riferimento per identificare le proteine presenti nel campione NMG.

Dopo ave