JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:02 min. • April 28th, 2025
Posizionare i punzoni a fetta di cervello di topi sani e neurodegenerativi su schermi portacampioni.
Capovolgi gli schermi e inseriscili in una piastra di tessuto.
Prendi una cartuccia del sensore precalibrata con le sonde del sensore. Caricare i composti (piruvato, oligomicina, FCCP e antimicina A) nelle porte di iniezione.
Posizionare la cartuccia sulla piastra di tessuto. Avviare la corsa in un analizzatore di flusso extracellulare.
Le sonde misurano il tasso di consumo di ossigeno della fetta o (OCR).
Con la prima iniezione, il piruvato entra nei mitocondri, generando trasportatori di elettroni.
Questi trasportatori donano elettroni ai complessi I e II della catena di trasporto degli elettroni (ETC), avviando una reazione di trasferimento di elettroni che aumenta il consumo di ossigeno e l'OCR.
L'oligomicina inibisce il complesso V, bloccando la sintesi di ATP e diminuendo l'OCR.
FCCP, un protonoforo, interrompe il gradiente protonico, aumentando il consumo di ossigeno e l'OCR.
L'antimicina A si lega al complesso III e blocca l'ETC, riducendo al minimo l'OCR.
Confrontare i profili OCR.
Una diminuzione dell'OCR nelle fette neurodegenerative indica una compromissione mitocondriale.
Aspirar
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici