Generazione di un modello di ratto di trasposizione del neuroma tibiale

Prendi un topo anestetizzato con una zampa posteriore rasata. Incidere da metà polpaccio alla caviglia, esponendo il muscolo.

Seziona lo strato di tessuto connettivo per rivelare il nervo tibiale.

Crea un tunnel sottocutaneo sotto la pelle. Sezionare il nervo per indurre una lesione.

Infilare l'estremità prossimale del nervo reciso attraverso il tunnel e suturarlo fino all'estremità distale del tunnel, posizionando il nervo per via sottocutanea.

Chiudi l'incisione, pulisci l'area e lascia che il topo si riprenda.

Dopo la transezione, il nervo degenera quando gli assoni e le guaine mieliniche si rompono.

Le cellule di Schwann denervate rilasciano molecole di segnalazione per attirare i macrofagi per la rimozione dei detriti, dopodiché il nervo reciso invia escrescenze assonali per promuovere la rigenerazione.

Senza strutture bersaglio adeguate per reinnervare, gli assoni disorganizzati formano un neuroma, una massa di assoni, cellule di Schwann, fibre di collagene e vasi sanguigni.

Gli assoni rigeneranti rilasciano molecole che eccitano i nocicettori vicini, i neuroni sensoriali che segnalano il dolore, portando a segnali di dolore associati al neuroma.

Individua il ginocchio e fai delicatamente un'incisione longitudinale di 2 o tre centimetri sul lato mediale della zampa posteriore da metà polpaccio alla caviglia usando un bisturi. Se necessario, aprire ulteriormente la pelle e il sottocute con le microforbici fino a quando gli strati muscolari non sono visibili. Identifica il fascio neurovascolare superficiale come due o tre linee bianche, viola o rosse che possono muoversi liberamente sugli strati muscolari. Mantenere intatto il fascio neurovascolare. Sezionare la parte posteriore da questo fascio.

Quindi, seziona per aprire la fascia tra i muscoli gastrocnemio. Tra la fascia dei muscoli si trova il fascio neurovascolare più profondo con il nervo tibiale, che è circa tre volte più grande del fascio neurovascolare superficiale. Usa l'osso tibiale come punto di riferimento aggiuntivo, poiché il nervo tibiale si trova appena dietro l'osso tibiale. Per sezionare il nervo tibiale libero dai fasci vascolari circostanti, muovere senza mezzi termini il nervo tibiale e tagliare il tessuto esposto che mostra un po' di allungamento mentre si muove il nervo tibiale.

Una volta che l'intero nervo tibiale è esposto, riposiziona gli strati muscolari per evitare la disidratazione del nervo fino alla dissezione della pelle pretibiale dal muscolo sottocutaneo. Per sezionare la pelle pretibiale dallo strato muscolare sottocutaneo e creare un tunnel sottocutaneo, tenere la pelle sollevata e spingere la punta smussata nel tessuto parallelamente alla pelle, utilizzando uno strumento di microchirurgia smussato. Assicurarsi che la fine del tunnel sia posizionata pretibialmente o lateralmente per una facile accessibilità dell'area per il test del neuroma.

Dopo aver tagliato il nervo tibiale all'estremità distale vicino alla caviglia, cambia l'ingrandimento del microscopio a 10x o 16x e identifica l'epinevrio del nervo tibiale prossimale al taglio fatto vicino alla caviglia, o nel caso di una biforcazione più prossimale del nervo tibiale, identifica l'epinevrio di entrambi i rami plantari mediali e laterali prossimali al taglio fatto vicino alla caviglia. Posiziona con cura un 8-0 Sutura in nylon attraverso l'epinevrio dell'estremità nervosa prossimale tenendo l'epinevrio con una pinzetta e inserendo l'ago tra il nervo e l'epinevrio con un morso di circa 0,5 millimetri.

Prendi un morso con l'ago per via sottocutanea alla fine del tunnel sottocutaneo e tira la sutura per trasporre il nervo lateralmente nel tunnel sottocutaneo. Fissare la sutura facendo un nodo. Posizionare una sutura più spessa di 4-0 con un colore scuro a filo all'estremità del nervo fissato senza penetrare nella pelle. Assicurarsi che la sutura sia visibile all'esterno della pelle.

Controlla se il nervo rimane al suo posto dopo aver mosso la zampa e i muscoli. Taglia le estremità della sutura con un'estremità della sutura leggermente più lunga sul solco rispetto all'8-0 sutura. Riportare l'ingrandimento del microscopio a 6x e chiudere la pelle con suture intraepidermiche, utilizzando l'8-0 sutura. Detergere delicatamente la pelle con cloruro di sodio allo 0,9% utilizzando un batuffolo di cotone.

Se la stanza è fredda, posiziona un termoforo, sotto una parte di una gabbia pulita e posiziona il topo nella gabbia sotto un tovagliolo di carta in una posizione comoda. Garantire un facile accesso a cibo e acqua.