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$$\longrightharp{xx}$$,
Inizia con un occhio umano. Rimuovere la guaina per esporre il nervo ottico.
Taglia in due l'occhio, poi rimuovi l'umor vitreo dal segmento posteriore.
Taglia la sclera, lo strato esterno, e allarga la retina contenente le cellule gangliari retiniche collegate al nervo ottico tramite la lamina cribrosa, una struttura simile a una rete.
Posiziona questo segmento sopra la cupola della camera inferiore del sistema translaminare autonomo, con il nervo ottico rivolto verso l'alto, quindi sigillalo.
Collega il tubo e fai fluire un mezzo di perfusione.
Il movimento del liquido crea pressione all'interno della conchiglia oculare, simile alla pressione intraoculare.
Quindi, posiziona la camera superiore che copre il nervo ottico e sigillala.
Collega il tubo per far scorrere il fluido intorno al nervo, simile alla pressione intracranica.
La differenza di pressione tra queste camere stabilisce una pressione translaminare attraverso la lamina cribrosa, consentendo lo studio della trasmissione del segnale delle cellule gangliari retiniche al nervo ottico in questa condizione di pressione.
Per preparare un campione di globo oculare umano intero, rimuovere la guaina del nervo ottico e rimuovere l'umor vitreo dal segmento posteriore. Per garantire un buon adattamento alla cupola rotonda della camera IOP, tagliare la sclera aggiuntiva dal segmento posteriore se necessario e utilizzare una pinza per garantire che la retina sia distribuita uniformemente sulla parte posteriore umana del segmento. Quindi posizionare il segmento nella camera IOP del TAS sopra la cupola rotonda, con il nervo ottico rivolto verso l'alto, e utilizzare un O-ring in resina epossidica e 4 viti per sigillare il segmento posteriore.
Per configurare la camera IOP, inserire il tubo nelle porte di ingresso e di uscita della camera e inserire la siringa di afflusso IOP nella porta di ingresso. Inserire la siringa di deflusso IOP vuota nella porta di uscita e utilizzare il metodo push-pull per infondere lentamente il mezzo di perfusione nella porta di afflusso per riempire la conchiglia oculare posteriore e contemporaneamente estrarre lentamente il mezzo di perfusione attraverso la siringa di deflusso per rimuovere eventuali bolle d'aria dalle linee. Una volta che i tubi di entrata e di uscita sono privi di bolle d'aria, arrestare l'infusione e bloccare i rubinetti in posizione off.
Rimuovere la siringa dal gruppo del filtro di importazione IOP e riempire nuovamente la siringa con altri 30 millilitri di terreno. Quindi reinserire la siringa nel gruppo filtro. Per allestire la camera ICP, posizionare la camera sul retro del segmento posteriore, facendo attenzione che il nervo ottico si trovi all'interno della camera superiore, e sigillare la camera superiore con 4 viti.
Quindi inserire il tubo nelle porte di ingresso e di uscita della camera ICP: la siringa di ingresso ICP nella porta di ingresso e la siringa di uscita ICP vuota nella porta di uscita per lavare il sistema con il fluido, come appena dimostrato.