Esecuzione dell'assotomia Crush sul nervo facciale in un modello murino

0 visualizzazioni3:37 min. • April 28th, 2025

Inizia con un topo anestetizzato posizionato su un fianco, con l'orecchio destro fisso e l'area dietro l'orecchio rasata.

Traccia la vena auricolare posteriore e fai una piccola incisione per accedere ai tessuti sottostanti.

Seziona gli strati di tessuto evitando danni alle strutture vicine.

Usa un batuffolo di cotone per fermare qualsiasi sanguinamento.

Individua il nervo facciale bianco.

Identifica il condotto uditivo, una struttura bianca perlacea, e il ventre muscolare digastrico come punti di riferimento chiave per localizzare con precisione il nervo facciale.

Analizza intorno a questi punti di riferimento per esporre il tronco del nervo facciale contenente un fascio di fibre assonali che trasmettono segnali ai muscoli facciali.

Mantieni aperta l'area esposta e, usando una pinza, schiaccia delicatamente il tronco del nervo facciale con una pressione costante.

Ripeti lo schiacciamento nello stesso sito da un angolo perpendicolare.

Questo schiacciamento controllato induce uno stress meccanico sulle fibre degli assoni, provocando il loro danneggiamento e l'interruzione della segnalazione neuronale.

Per determinare la posizione della prima incisione, tracciare la vena auricolare posteriore dall'orecchio caudalmente all'area posteriore della protuberanza dell'orecchio. Quindi, usando le forbici a molla, praticare un'incisione di 4 millimetri da 2 a 3 millimetri posteriormente alla protuberanza. A scopo didattico, questa incisione sarà ingrandita per esporre l'anatomia sottostante.

Ora, eseguire una dissezione smussata del grasso sottocutaneo e della fascia. I vasi sanguigni e i muscoli possono essere facilmente danneggiati dalle forbici. In caso di sanguinamento, applicare pressione con un batuffolo di cotone sterile per almeno 30 secondi. Se si è verificata una significativa perdita di liquido, iniettare fino a 1/2 millilitro di soluzione fisiologica per via intraperitoneale con un ago calibro 25 o 27.

Ora, individua il nervo facciale utilizzando i punti di riferimento chiave. Il nervo spinale accessorio è superficiale al nervo facciale e può essere visto viaggiare dalla porzione caudale del cranio, per innervare il muscolo trapezio. Identificare il condotto uditivo cartilagineo. È bianco perlaceo e può essere visto rostrale al nervo facciale. Il nervo facciale avvolge la parte caudale del condotto uditivo.

Quindi, identificare il ventre muscolare del muscolo digastrico anteriore che si trova sopra e caudale al nervo facciale. Sezionare sotto questa struttura per esporre il nervo facciale. Si tratta di una solida struttura bianca aderente a uno strato di fascia sottostante. Identificare i rami principali del nervo facciale. Tracciali dorsalmente alla loro origine dal forame stilomastoideo.

Usa una pinza fine per tenere aperto il sito mentre usi la punta delle forbici a molla per sezionare lungo il percorso del nervo facciale. Il forame stilomastoideo osseo può essere percepito dal forcipe. Ora, identifica il tronco del nervo facciale. Per schiacciare il nervo, comprimerlo con la pinza fine per 30 secondi con una pressione costante. Questo taglierà tutti gli assoni. Quindi ripetere la compressione ad angolo perpendicolare per altri 30 secondi. Mantieni la pressione costante tra gli esperimenti.