Induzione di condizioni ipossico-ischemiche e infiammatorie per modellare l'encefalopatia nei ratti prenatali

Prendi una rata incinta anestetizzata con corna uterine esteriorizzate contenenti feti posizionati su una garza umida.

Posiziona clip per aneurisma sulle arterie uterine esposte per limitare il flusso sanguigno, evidenziato dall'oscuramento dei vasi uterini.

Questa restrizione induce condizioni ipossico-ischemiche privando i feti di ossigeno e sostanze nutritive, portando a danni al sistema nervoso centrale.

Idrata regolarmente le corna uterine con soluzione fisiologica sterile.

Dopo il periodo di occlusione, sciacquare le corna uterine e rimuovere le clip per aneurisma per ripristinare il flusso sanguigno.

Inietta un lipopolisaccaride o LPS e una miscela di colorante nel liquido amniotico di ogni sacco amniotico, usando il colorante per confermare visivamente l'iniezione.

Risciacqua le corna uterine, rimettile nella cavità peritoneale e chiudi l'incisione.

Nel liquido amniotico, LPS si lega ai recettori delle cellule immunitarie, innescando il rilascio di citochine pro-infiammatorie.

Queste citochine raggiungono il cervello fetale, attivano le cellule microgliali e causano neuroinfiammazione, con conseguente danno cerebrale ed encefalopatia fetale.

Quando le arterie sono state isolate,