Generazione di un modello di ratto con glioblastoma

Prendi un topo anestetizzato.

Rasa il cuoio capelluto. Quindi, applica il gel per gli occhi per mantenere l'idratazione corneale.

Fissa l'animale su una struttura stereotassica e disinfetta il sito chirurgico. Fai un'incisione sulla linea mediana e ritraila per esporre il cranio.

Pratica un foro nell'emisfero frontale destro per accedere alla corteccia prefrontale.

Posiziona una siringa stereotassicamente guidata contenente una sospensione di cellule di glioblastoma, o tumore cerebrale, sopra il sito perforato.

Utilizzando un controller a pompa, inietta la sospensione cellulare nella corteccia prefrontale.

Ritira lentamente l'ago per evitare il reflusso delle cellule iniettate. Quindi, sigillare il sito perforato con cera ossea.

Sutura l'incisione chirurgica e disinfetta il sito.

Riporta il topo nella sua gabbia e usa una lampada rossa per mantenere la temperatura corporea.

Dopo l'iniezione, le cellule tumorali cerebrali proliferano, si infiltrano nel tessuto circostante e inducono l'angiogenesi, interrompendo la normale funzione cerebrale e generando un modello di glioblastoma.

Per inoculare il cervello di un ratto fisher F344 anestetizzato di 170 grammi, femmina, con cellule di glioma, in primo luogo, confermare la sedazione per mancanza di risposta al pizzicamento delle dita. Rimuovi i peli dall'altezza degli occhi alla parte posteriore del cranio e applica un unguento sugli occhi degli animali. Immobilizzare l'animale in un dispositivo stereotassico. Disinfettare la pelle esposta con iodio povidone ed esporre il cranio con un'incisione del cuoio capelluto di 2 centimetri. Usando un trapano diamantato, fai un foro di 1 millimetro, 2 millimetri posteriore e 2 millimetri e mezzo lateralmente al bregma nell'emisfero frontale destro.

Quindi, caricare l'ago di una siringa da insulina calibro 29 con 5 microlitri di sospensione cellulare. E usa un controller per micro-pompa a siringa per iniettare le cellule a tre millimetri di profondità nel cranio sotto guida stereotassica e ritirare lentamente l'ago. Chiudere l'incisione con cera d'ossa. Quindi, suturare e disinfettare la pelle con altro iodio povidone. E utilizzare una lampada rossa per stabilizzare la temperatura corporea dell'animale, dopo l'intervento chirurgico, con monitoraggio fino al completo recupero.