JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:48 min. • April 28th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato con un osso del cranio esposto.
Applica un agente di incisione per rimuovere il periostio e creare una superficie più pulita.
Posiziona il supporto per occhiali con le montature delle lenti in modo che gli occhi siano centrati all'interno delle montature.
Applica l'adesivo al supporto e lascialo solidificare, fissandolo al teschio.
Rimuovi le montature delle lenti per ridurre al minimo il disagio durante il recupero.
Inietta intraperitonealmente un agente di recupero per recuperare il mouse.
Quando il mouse è sveglio, riattacca la montatura contenente lenti concave che coprono gli occhi.
Queste lenti disperdono la luce in entrata, facendola convergere dietro la retina e provocando una visione offuscata.
I neuroni retinici rilevano la sfocatura e segnalano al cervello di allungare il bulbo oculare per focalizzare la luce sulla retina per una visione chiara.
Dopo che le lenti sono state rimosse, il bulbo oculare allungato fa convergere la luce davanti alla retina, compromettendo la visione da vicino nel topo e provocando miopia.
Per fissare la montatura della maschera precedentemente preparata sul mouse, in primo luogo, applicare una goccia di collirio di ialuronato di sodio purificato allo 0,1% su ciascun occhio e posizionare il mento del topo anestetizzato su una superficie inclinata, in modo che il piano anteriore del cranio sia orizzontale. Usa un batuffolo di cotone imbevuto di etanolo al 70% per sterilizzare i capelli e il cuoio capelluto tra le orecchie e gli occhi e fai un'incisione di 0,8 centimetri quadrati nella pelle tra le orecchie e gli occhi per esporre il cranio. Usa il liquido mordenzante dentale in un batuffolo di cotone per rimuovere il periostio e usa un paio di montature senza lenti per fissare il bastoncino nella giusta posizione, regolando attentamente la posizione delle montature per assicurarti che entrambi gli occhi siano al centro delle montature vuote.
Utilizzare un sistema adesivo dentale autopolimerizzabile per fissare il bastoncino alla testina del mouse e attendere circa cinque minuti prima di rimuovere con cura il telaio e il dado senza modificare la posizione del bastoncino. Quindi, iniettare 0,75 milligrammi per chilogrammo di atipamezolo cloridrato per via intraperitoneale per aiutare il topo a riprendersi dall'anestesia più rapidamente e posizionare il topo in una gabbia individuale fino a completo recupero. 24 ore dopo l'intervento, afferrare il bastoncino e posizionare le montature con le lenti sull'animale per avviare l'induzione della miopia.