Generazione di un'occlusione dell'arteria cerebrale media in un cucciolo di ratto per indurre l'ischemia cerebrale locale

Inizia con un cucciolo di ratto anestetizzato su un termoforo.

Sterilizza l'area cervicale alternativamente con etanolo e iodio povidone. Somministrare l'anestesia locale nel sito dell'incisione.

Praticare un'incisione cervicale, esponendo l'arteria carotide comune.

Posiziona i divaricatori per garantire un accesso libero.

Identifica l'arteria carotide interna o ICA e rimuovi il tessuto circostante.

Lega una legatura attorno alla base dell'ICA e ritraila per fermare temporaneamente il flusso sanguigno.

Posiziona una seconda legatura allentata sull'ICA.

Fai un'incisione tra le legature.

Prendi una sutura per occlusione in nylon rivestita di silicone e inseriscila attraverso l'incisione fino a raggiungere l'arteria cerebrale media o MCA.

Questo blocca il flusso sanguigno all'MCA, inducendo un'ischemia locale nel cervello.

Lega la legatura attorno alla sutura dell'occlusione per fissarla.

Chiudi il sito dell'incisione. Lasciare che il cucciolo si riprenda prima di ulteriori studi.

Dopo aver anestetizzato il cucciolo utilizzando isoflurano inalato secondo i protocolli approvati, assicurarsi che non vi sia risposta a un pizzicamento del piede. Mantenere la temperatura della superficie corporea con l'uso di un termoforo sotto la fase chirurgica. Fissare l'animale in posizione supina con del nastro adesivo sulle regioni delle spalle.

Utilizzare tamponi di cotone sterili per tamponare l'area cervicale anteriore con etanolo al 70%, seguiti da un tampone di soluzione di iodio povidone. Successivamente, infiltrare localmente lo 0,25% di bupivacaina nel sito di incisione pianificato. Quindi, mentre si lavora attraverso uno stereoscopio, praticare un'incisione cervicale anteriore di 5-7 millimetri per esporre l'arteria carotide comune.

Posizionare da 2 a 4 divaricatori per mantenere la cavità aperta e l'arteria esposta. Quindi, individua l'arteria carotide interna, l'arteria occipitale e l'arteria carotide esterna. Rimuovere il tessuto connettivo e il grasso dalle arterie per avere una visione chiara.

Dopo aver tagliato 1,5 centimetri di filo di sutura intrecciato di seta 6-0. Slacciare la sutura, estraendo i singoli fili. Assicurati che i singoli fili siano puliti e non sfilacciati.

Tenendo il filo di sutura con una pinza a 45 gradi, spazzare la pinza in un arco sotto l'ICA in modo che le punte emergano tra l'ICA e l'OA. Quindi, afferra l'estremità del filo di sutura e tiralo in modo che l'estremità sia di facile accesso. Rilasciare il filo dalla pinza e far uscire la pinza da sotto l'ICA, invertendo il movimento precedente.

Legare una legatura temporanea attorno all'ICA alla base più vicina al punto in cui si separa dal CCA. Ritrarre con cautela l'ICA lateralmente, quindi utilizzare una clip per fissare il filamento retrattile alla pelle in eccesso vicino alla regione ascellare sul lato opposto all'incisione. Assicurarsi che il filo retrattile sia sufficientemente teso da interrompere il flusso sanguigno prima di procedere al passaggio successivo.

L'arteria dovrebbe essere piatta e pallida. Usa una pinza a 45 gradi per afferrare un altro filo di sutura non intrecciato e avvolgilo sotto e intorno all'ICA come prima. Posizionare questo filo lateralmente al filo di retrazione.

Quindi tagliare un'arteriotomia di 0,2 millimetri, a metà strada tra le legature legate e quelle slegate, sono più vicine alla legatura legata. Ora, utilizzando un righello metrico, misura 10 millimetri di sutura in nylon rivestita di silicone come sutura occludente. Tagliare la sutura con un margine extra di 2 o 3 millimetri per la rimozione durante la riperfusione.

Tenere la sutura occlusiva con una pinza a 45 gradi e utilizzare una pinza diritta per creare una curva, segnando il punto di arresto dell'avanzamento. Inserire la sutura occlusiva nell'arteriotomia, puntandola parallelamente all'ECA e verso la testa. Far avanzare dolcemente la sutura fino a raggiungere la curva. Quindi utilizzare il filo posizionato lateralmente al filamento di retrazione per legare una legatura temporanea per fissare la sutura dell'occlusione. Rimuovere la clip del divaricatore. Quindi taglia i fili di entrambe le legature temporanee, lasciando il filo che servirà per rimuovere il nodo più lungo del filo usato per stringerlo. Rimuovere i divaricatori. E chiudi la cavità usando seta intrecciata 6-0 per creare tre o quattro suture interrotte.

Togliete il cucciolo dall'anestesia e mettetelo su un termoforo all'aria ambiente. Monitorare il cucciolo fino a quando non ha riacquistato sufficiente coscienza per mantenere la decubito sternale e assicurarsi che si sia completamente ripreso prima di riportarlo alla madre.