Generazione di un modello murino con una lesione del midollo spinale

Inizia con un topo anestetizzato con i peli rimossi sul lato dorsale.

Applica un unguento per prevenire la secchezza corneale.

Sterilizzare in sequenza la pelle usando betadine, seguita da etanolo.

Inietta l'anestesia locale nel sito dell'incisione.

Individua la vertebra toracica o T13 identificando le ultime costole fluttuanti. Quindi, identificare le vertebre T8-T12 e praticare un'incisione sulla linea mediana.

Rimuovi il tessuto adiposo sottocutaneo per accedere ai muscoli paraspinali.

Libera questi muscoli per esporre le lamine vertebrali.

Analizza le lamine delle vertebre T9-T10 per accedere al midollo spinale.

Transect completamente il midollo spinale per indurre una lesione del midollo spinale o una lesione midollare.

Posiziona un pezzo di grasso sottocutaneo sul sito chirurgico per proteggere il midollo spinale.

Sutura i muscoli e il tessuto connettivo, poi chiudi l'incisione cutanea.

Il modello del topo SCI è ora pronto per ulteriori studi.

Anestetizzare gli animali e applicare l'unguento oftalmico sulle cornee per proteggere gli occhi dalla secchezza durante la procedura chirurgica. Quindi strofinare la pelle dell'animale tre volte ciascuna con scrub betadine ed etanolo al 70%.

Prima dell'incisione, utilizzare una siringa con un ago calibro 25 per iniettare 100 microlitri di bupivicaina allo 0,125% attorno al sito dell'incisione come analgesia. Contare a ritroso dalle nervature flottanti che corrispondono a T13 per identificare da T8 a T12. Dopo aver creato un'incisione da 1 a 1,5 centimetri lungo la linea mediana sulla schiena a livello della vertebra da T8 a T12, eliminare il tessuto adiposo sottocutaneo per accedere ai muscoli paraspinali. E poi sezionali lentamente per esporre i processi spinosi e la lamina su entrambi i lati.

È molto importante eseguire questa procedura con molta attenzione per evitare sanguinamenti eccessivi e lesioni al midollo spinale.

Eseguire una laminectomia delle vertebre da T9 a T10 per esporre il midollo spinale staccando delicatamente la lamina spinale utilizzando una pinza per microdissezione. Usa una pinza per fissare e sollevare la colonna vertebrale a T8 per esagerare la curvatura della colonna vertebrale. Quindi utilizzare le forbici sottili per sezionare il midollo spinale tra le vertebre T9 e T10, fino al pavimento del canale vertebrale per garantire una transezione completa.

Dopo aver osservato la transezione completa al microscopio operatorio, applicare un pezzo di grasso sottocutaneo sul sito di laminectomia per fornire una protezione aggiuntiva al midollo spinale prima della chiusura del sito chirurgico. Infine, chiudere la ferita e suturare i muscoli paravertebrali e la fascia superficiale. Quindi chiudere la pelle utilizzando clip di sutura.