JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
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Inizia con un topo transgenico anestetizzato contenente aggregati proteici patogeni, che causano neuroinfiammazione e attivazione degli astrociti, portando ad un aumento dell'espressione della luciferasi.
Rimuovi la pelliccia dalla sua testa per evitare la dispersione della luce durante l'imaging.
Colora le orecchie con un pennarello non irritante per bloccare la bioluminescenza non specifica.
Prendi un volume appropriato di luciferina in base al peso corporeo del topo e iniettalo per via intraperitoneale.
La luciferina entra nel flusso sanguigno, raggiunge il cervello e viene assorbita dagli astrociti attivati.
All'interno dell'astrocita, la luciferasi ossida la luciferina, emettendo un segnale bioluminescente.
Imposta i parametri di imaging e posiziona con precisione il mouse sulla piastra riscaldante della camera di imaging a bioluminescenza.
Assicurati che il flusso di anestesia sia sia corretto e catturi il segnale bioluminescente per la durata desiderata.
Quindi, seleziona la regione di interesse e quantifica il segnale bioluminescente mirato.
L'intensità di questo segnale corrisponde all'attività della luciferasi, riflettendo l'attivazione astrocitaria e fornendo una misura diretta
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