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Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:48 min. • May 29th, 2025
Inizia con una configurazione di microscopio a fluorescenza contenente un diaframma immobilizzato con nervi frenici di un topo transgenico.
La giunzione neuromuscolare del diaframma è costituita da un motoneurone, una fibra muscolare e cellule di Schwann contenenti recettori dell'acetilcolina e canali del calcio.
Queste cellule hanno recettori dell'acetilcolina marcati in fluorescenza ed esprimono indicatori intracellulari del calcio.
Uno splitter di immagini collegato alla configurazione consente la visualizzazione simultanea di entrambi i segnali fluorescenti.
Il nervo frenico è posizionato in un elettrodo di aspirazione per fornire uno stimolo elettrico.
Al microscopio a fluorescenza, visualizzare i recettori dell'acetilcolina per identificare una giunzione neuromuscolare.
Per impostare una fluorescenza massima di base, aggiungere una soluzione di cloruro di potassio per depolarizzare temporaneamente la membrana cellulare. Questo innesca l'afflusso intracellulare di calcio, causando un aumento della fluorescenza degli indicatori.
Regolare le impostazioni di luminosità per evitare la sovrasaturazione del segnale di fluorescenza.
Dopo la ripolarizzazione, applicare stimolazioni elettric
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