Visualizzazione della sinaptogenesi dei neuroni dei granuli cerebellari in diversi stadi di sviluppo

Inizia con fette di tessuto cerebrale prefissate raccolte da stadi postnatali precoci e tardivi di topi.

La fetta contiene neuroni granulari cerebellari, o CGN, che esprimono una proteina fluorescente.

Utilizzando un microscopio confocale, mettere a fuoco una singola CGN fluorescente.

Acquisisci immagini z-stack a profondità variabili per creare una visione tridimensionale del neurone.

Utilizzando il software di imaging, traccia i neuriti dei neuroni o le lunghe proiezioni, inclusi dendriti e assoni.

Misurare la lunghezza dei dendriti dal corpo cellulare alla sua punta.

Analizza la formazione degli artigli dendritici, strutture specializzate sulle punte dei dendriti dove vengono ricevuti i segnali da altri neuroni.

Inoltre, valuta la superficie e il volume del neurone.

Nella prima fase postnatale, i neuroni mostrano un numero maggiore di dendriti, senza formazione di unghie

.

Nel frattempo, nella tarda fase postnatale, ci sono meno dendriti, ma le loro lunghezze e il numero di unghie aumentano.

Pertanto, con l'età, i CGN subiscono sinaptogenesi e formano connessioni con altre cellule per la trasmissione del segnale.

Per studiare la morfologia di singoli CGN elettroporati da sezioni cerebral