Imaging dal vivo dell'occhio pupale di Drosophila mediante microscopia a fluorescenza

0 visualizzazioni • 4:22 min. • May 29th, 2025

Inizia con una pupa di Drosophila transgenica con un occhio esposto.

Posiziona la pupa su una perlina di gelatina all'interno di una cornice di carta idratata, circondata da un anello di gelatina.

L'occhio della pupa contiene proteine di giunzione marcate con GFP che evidenziano i confini cellulari nel neuroepitelio dell'occhio in via di sviluppo.

Premere delicatamente un vetrino coprioggetti sulla regione dell'occhio della pupa.

Al microscopio a fluorescenza, le giunzioni marcate con GFP diventano fluorescenti, mostrando l'organizzazione del neuroepitelio.

Scatta immagini a intervalli regolari a diverse profondità ed elabora le immagini per migliorare il contrasto e ridurre al minimo il rumore di fondo.

Allinea queste immagini con intervalli di tempo crescenti per monitorare il neuroepitelio in via di sviluppo.

Inizialmente, le cellule primarie formano confini attorno a gruppi di cellule fotorecettoriali, mentre le cellule interommatidiali o IC si organizzano in un singolo strato.

Successivamente, gli IC si differenziano in cellule secondarie e terziarie vicino ai fotorecettori.

Infine, gli IC in eccesso vengono rimossi attraverso la morte cellulare programmata, formando un reticolo esago

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Giunzioni marcate con GFP