Monitoraggio del recupero delle cellule interneuromast ablate con laser in zebrafish mediante microscopia confocale

0 visualizzazioni • 2:39 min. • May 29th, 2025

Iniziare con una larva di zebrafish contenente cellule interneuromastali o INMC marcate in modo fluorescente, montate su un vetrino coprioggetti e poste sotto un microscopio confocale.

Le INMC sono cellule progenitrici con capacità rigenerativa che sono state precedentemente sottoposte ad ablazione laser.

Innanzitutto, osserva l'area danneggiata in modalità fluorescenza. L'assenza di fluorescenza conferma il successo dell'ablazione laser.

Successivamente, utilizzare la modalità di imaging a luce trasmessa per esaminare l'area danneggiata in cui la cellula appare granulare e gonfia con nuclei irregolari, confermando la morte cellulare.

Il reclutamento di macrofagi nel sito indica una risposta cellulare attiva al danno.

A questo punto, è possibile tornare alla modalità di fluorescenza e acquisire immagini time-lapse a intervalli regolari per monitorare il recupero.

Durante la fase di recupero, gli INMC estendono le proiezioni nello spazio, facilitando la chiusura e promuovendo la riparazione cellulare.

Salvate queste immagini di serie temporali per l'analisi. La ricomparsa di una fluorescenza distinta nell'area ablata conferma il successo del recupero cellulare.

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