Imaging dal vivo dell'attività ciliare delle cellule ependimali in una sezione cerebrale di topo

0 visualizzazioni • 2:56 min. • May 29th, 2025

Prendi una sezione sagittale del cervello di un topo per esporre i ventricoli, che sono cavità piene di liquido cerebrospinale, o CSF.

Le cellule ependimali che rivestono i ventricoli possiedono ciglia mobili che spingono il liquido cerebrospinale per facilitarne la circolazione.

Metti la sezione in un piatto con fondo di vetro contenente un mezzo ricco di sostanze nutritive per sostenere l'attività ciliare.

Trasferire la capsula nella camera climatizzata di un microscopio a contrasto di interferenza differenziale, o DIC, per mantenere la vitalità cellulare durante l'imaging.

La microscopia DIC impiega un prisma per dividere la luce polarizzata, dirigendola attraverso il campione lungo diversi percorsi.

Le variazioni dell'indice di rifrazione nel campione introducono differenze di fase tra i fasci.

Un secondo prisma ricombina i raggi, creando un'interferenza che produce un'immagine ad alto contrasto con un effetto tridimensionale, migliorando la visibilità delle strutture fini.

Localizzare le cellule ependimali funzionali con ciglia mobili osservando il movimento delle bolle generato dal loro battito.

Utilizzando l'imaging DIC ad alto contrasto, registrare le ciglia per quantificare la lor

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Ciglia ependimali