JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:24 min. • June 17th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato fissato in un sistema di gabbie mobili.
Il topo ha una lente con indice di rifrazione gradiente pre-impiantata che prende di mira l'amigdala del cervello, dove i neuroni esprimono una proteina fluorescente sensibile al calcio.
La superficie della lente è coperta per protezione.
Lascia che il mouse si risvegli, quindi applica il flusso d'aria per una rotazione della gabbia senza attrito.
Rimuovere il copriobiettivo e posizionare un microscopio miniaturizzato sopra il cervello.
Accendere il LED del microscopio. Quindi, allineare il microscopio in modo che la lente sia centrata nel campo visivo.
Cattura l'immagine dell'obiettivo e regola la posizione del microscopio.
Mentre la gabbia ruota, i movimenti delle zampe del topo generano paura, stimolando i neuroni dell'amigdala.
Questo innesca un afflusso di ioni calcio, che si legano agli indicatori fluorescenti.
La luce LED eccita questi indicatori legati al calcio, provocandone la fluorescenza.
La lente con indice di rifrazione a gradiente cattura e trasmette in modo efficiente questa fluorescenza al microscopio.
Ciò consente l'imaging del calcio in tempo reale dell'attività neuronale dell'amigdala.
Per valutare la
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