Imaging del calcio in tempo reale di una corteccia prefrontale mediale di topo utilizzando un miniscopio

0 visualizzazioni • 2:55 min. • June 17th, 2025

Prendiamo un topo anestetizzato trasdotto impiantato con una lente a indice di gradiente che ha come bersaglio la corteccia prefrontale mediale, dove i neuroni esprimono indicatori di calcio geneticamente codificati.

Rimuovere il copriobiettivo e pulirne la superficie per una chiara trasmissione della luce.

Fissare il miniscopio al supporto dell'obiettivo.

Regolare la posizione del miniscopio per identificare il piano focale ottimale. Questa regolazione garantisce una chiara visualizzazione dei corpi cellulari neuronali.

Staccare il cavo e consentire al mouse di riprendersi.

Collegare il cavo al miniscopio e trasferire il mouse in una camera con una configurazione di registrazione comportamentale.

Durante l'imaging, il miniscopio emette luce per eccitare gli indicatori di calcio, che emettono fluorescenza in caso di afflusso intracellulare di calcio.

La lente con indice di gradiente trasmette questi segnali ottici dai tessuti cerebrali profondi al miniscopio, riducendo la dispersione della luce e consentendo la visualizzazione in tempo reale dell'attività neuronale.

Elaborare l'attività transitoria del calcio registrata con osservazioni comportamentali per correlare l'attività neuronale a

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