JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:44 min • June 17th, 2025
Prelevare una spessa fetta di tessuto cerebrale di topo fissata al supporto del campione. Posizionare una camera di immersione sopra il supporto e riempirla con un mezzo indipendente dall'anidride carbonica per mantenere l'idratazione dei tessuti.
Montare il supporto sullo stadio del nanopenetratore strumentato calibrato.
Allineare la camera di immersione in modo che la sonda sferica collegata al braccio del pendolo si trovi direttamente
sopra la camera.
Sollevare la camera fino a quando la sonda non è immersa nel fluido e allineata con la superficie del tessuto.
Portare la sonda a contatto con la superficie del tessuto, quindi ritrarla leggermente per consentire il libero movimento del pendolo e garantire un'applicazione precisa della forza.
Inizia l'esperimento di nanoindentazione, in cui il pendolo oscilla in avanti e colpisce il tessuto. Questo impatto penetra la superficie e avvia un movimento oscillatorio dovuto al
comportamento armonico
smorzato.Misura lo spostamento del pendolo e la velocità per valutare la profondità di penetrazione, la dissipazione di energia e lo smorzamento. Queste misurazioni rivelano le proprietà meccaniche del tessuto, come la rigidità e l'elasticità.
Quando l'impostazione della rientranza dell'impatto è completamente completa, aspirare il terreno e asciugare la fetta di cervello. Quindi utilizzare un sottile strato di adesivo cianoacrilato per fissare il cervello affettato al perno del campione in alluminio.
Quindi far scorrere la cella del liquido sul secondo O-ring sul perno del campione. E riempire la cella liquida con 5 millilitri di terreno indipendente dall'anidride carbonica per immergere completamente il tessuto.
Spostare la vasca nella direzione x negativa fino a quando la punta del braccio di leva non è posizionata correttamente sopra la vasca. Quindi, spostarsi nella direzione z positiva fino a quando la punta non è completamente immersa nel bagno e si trova davanti al campione.
Utilizzando la finestra di controllo del tavolino di campionamento, fare un contatto con cautela e quindi allontanare il tavolino dalla superficie del campione di circa 30 micrometri.
Nel menu Esperimento, fai clic su Impatto e configura un esperimento di impatto. Scegli un carico impulsivo specifico che si riferisca direttamente alla velocità di impatto risultante in base alla calibrazione della distanza di oscillazione. E quindi eseguire l'esperimento pianificato.
Quando il pendolo oscilla all'indietro e la superficie del campione continua a spostarsi sul piano di misurazione, spegnere il finecorsa inferiore. Lo spostamento della sonda in funzione del tempo verrà registrato dal software.