Imaging a bioluminescenza per valutare la crescita tumorale in una fetta di cervello di topo organotipico

Prendi una piastra a più pozzetti contenente una fetta di cervello di topo organotipico con cellule tumorali. Queste cellule esprimono l'enzima luciferasi.

Sollevare l'inserto per aggiungere la soluzione di luciferina nel terreno e mescolare bene. Riposizionare l'inserto nel pozzo.

La luciferina entra nella cellula tumorale e viene ossidata dalla luciferasi, emettendo bioluminescenza.

Posizionare la piastra all'interno della camera di imaging del sistema di imaging in vivo, che può catturare la bioluminescenza emessa dal campione.

Bloccare la camera per evitare interferenze di luce esterna.

Regola le impostazioni della fotocamera per acquisire un singolo pozzetto per immagine.

Spostare il tavolino per posizionare il pozzo direttamente sotto la telecamera.

Ottimizza il tempo di acquisizione in base all'intensità della bioluminescenza emessa.

Definisci la forma del tumore, quindi inizia l'imaging in bioluminescenza.

Quantificare il segnale bioluminescente per valutare la crescita del tumore sulla fetta di cervello.

Pipettare 5 microlitri di soluzione di luciferina da 30 milligrammi per millilitro nel terreno sotto gli inserti all'interno di una cappa sterile. Posizionare la piastra a sei pozz